La historia está centrada en Cassandra Webb, quien es una paramédico en Manhattan y tiene habilidades psíquicas que le permiten ver dentro del Mundo Spider, topando su camino con Julia Carpenter, Mattie Franklin y Anya Corazón, quienes en el futuro serán tres heroínas con habilidades arácnidas y están siendo cazadas por Ezekiel Sims sin una aparente razón alguna.

La película que se estrenará el 14 de febrero del 2024, es protagonizada por Dakota Johnson, mejor conocida por interpretar a Anastasia Steele en la saga de 50 Sombras de Grey y se unen en el reparto Sydney Sweeney, Celeste O’Connor, Isabela Merced y Tahar Rahim.

Madame Web se une al universo de cintas como Venom, su secuela y Morbius, continuando posteriormente con Kraven el Cazador y la tercera parte de Venom.